隨著護(hù)膚場(chǎng)景及需求的日益增長(zhǎng)，消費(fèi)者對(duì)護(hù)膚品的關(guān)注點(diǎn)已從基礎(chǔ)護(hù)理逐步轉(zhuǎn)向功效實(shí)現(xiàn)，產(chǎn)品實(shí)際有效性也更受大眾關(guān)注。重組膠原蛋白是采用合成物學(xué)方法制造的一類生物活性成分，近些年來(lái)在敷料和護(hù)膚品等領(lǐng)域應(yīng)用越來(lái)越廣泛。近期，圍繞重組膠原蛋白成分檢測(cè)的方法與結(jié)果可信度引發(fā)了廣泛討論，眾多專業(yè)人士自發(fā)選品檢測(cè)，檢測(cè)方法各有論點(diǎn)。那么，究竟如何科學(xué)檢測(cè)，其結(jié)果才具有足夠的科學(xué)說(shuō)服力和行業(yè)公信力？
多方權(quán)威深入探討
揭示重組膠原蛋白成分檢測(cè)核心難題
5月30日，中國(guó)生物工程學(xué)會(huì)科創(chuàng)中國(guó)工作委員會(huì)聯(lián)合昌平合成生物制造轉(zhuǎn)化加速中心舉辦了“復(fù)雜基質(zhì)中重組膠原蛋白檢測(cè)方法”研討會(huì)。會(huì)中，生物醫(yī)藥、分析檢測(cè)、材料科學(xué)等多領(lǐng)域?qū)＜揖劢箯?fù)雜基質(zhì)中重組膠原蛋白的分離與純化技術(shù)挑戰(zhàn)、高靈敏度及高特異性檢測(cè)方法的開發(fā)與驗(yàn)證、標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)體系的建立與行業(yè)監(jiān)管需求等主題，解析技術(shù)難點(diǎn)，分享實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，并為檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)化與相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的制定提供建議。
圖： “復(fù)雜基質(zhì)中重組膠原蛋白檢測(cè)方法”研討會(huì)
國(guó)家蛋白質(zhì)科學(xué)中心研究員賈辰熙表示，化妝品中的重組膠原蛋白檢測(cè)相較于敷料類醫(yī)療器械和生物樣本更為復(fù)雜。化妝品中添加了植物提取物、蛋白質(zhì)、多糖、脂類、表面活性劑及色素等多種成分，會(huì)嚴(yán)重干擾膠原蛋白信號(hào)，導(dǎo)致檢測(cè)時(shí)其信號(hào)較弱。同時(shí)，化妝品中膠原蛋白添加量通常較低，對(duì)低濃度物質(zhì)進(jìn)行定量檢測(cè)難度大。
成分檢測(cè)沒有“萬(wàn)能鑰匙”
方法學(xué)驗(yàn)證是關(guān)鍵
目前，針對(duì)復(fù)雜基質(zhì)中重組膠原蛋白的檢測(cè)方法尚未出臺(tái)國(guó)家統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。中國(guó)科學(xué)院過(guò)程工程研究所研究員張貴鋒介紹，蛋白檢測(cè)方法主要有凱氏定氮法、雙縮脲法、考馬斯亮藍(lán)法、福林酚法、BCA法及特征多肽法等。
圖：張貴鋒教授做《復(fù)雜基質(zhì)樣品中重組膠原蛋白的檢測(cè)方法》主題報(bào)告
對(duì)于不同的檢測(cè)方法，與會(huì)嘉賓紛紛表示，不同的檢測(cè)方法各有特點(diǎn)，均有其適配的應(yīng)用場(chǎng)景，無(wú)關(guān)新舊，關(guān)鍵是要根據(jù)不同基質(zhì)，建立樣品前處理方法，有效排除基質(zhì)的干擾，選擇和建立針對(duì)復(fù)雜基質(zhì)的檢測(cè)方法，并通過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證其檢出限、定量限、線性、精密度、準(zhǔn)確性及檢測(cè)回收率。
清華大學(xué)化學(xué)系教授、中國(guó)科學(xué)院院士李景虹解釋說(shuō)，復(fù)雜基質(zhì)中重組膠原蛋白的分子檢測(cè)存在降解過(guò)程復(fù)雜等難點(diǎn)，不能選用單一的檢測(cè)方法，需根據(jù)不同蛋白的差異性選擇相應(yīng)的檢測(cè)方法，并對(duì)不同類型重組膠原蛋白的不同氨基酸序列、結(jié)構(gòu)包括動(dòng)態(tài)變化和相互作用進(jìn)行研究和驗(yàn)證。
中國(guó)食品藥品檢定研究院研究員徐麗明介紹，重組膠原蛋白產(chǎn)品中的復(fù)雜基質(zhì)是影響成分檢測(cè)的重要因素?，F(xiàn)行的標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)方法主要針對(duì)純蛋白質(zhì)樣品，測(cè)定方法在復(fù)雜基質(zhì)中進(jìn)行套用時(shí)，需考慮基質(zhì)影響，做好樣品前處理方法研究和驗(yàn)證。“當(dāng)復(fù)雜基質(zhì)導(dǎo)致重組膠原蛋白成分提取困難時(shí)，需要研究基質(zhì)存在情況下的前處理方法，并確保定量用標(biāo)品和供試品是相同的檢測(cè)條件（基質(zhì)環(huán)境），如基質(zhì)加標(biāo)的方式，且需通過(guò)多種方法進(jìn)行相互驗(yàn)證。”
北京師范大學(xué)化學(xué)學(xué)院教授閆東鵬指出，為了排除干擾，提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性，需要提供重組膠原蛋白產(chǎn)品前處理的方法，根據(jù)不同應(yīng)用場(chǎng)景、不同研究體系，采用不同方法進(jìn)行優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)。
針對(duì)復(fù)雜基質(zhì)中重組膠原蛋白的檢測(cè)方法，徐麗明建議，可以采用多種方法進(jìn)行考察，比如雙縮脲法和氨基酸法等，但是也需進(jìn)行充分驗(yàn)證。“雙縮脲法是在行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)里列出的一個(gè)方法，但是在復(fù)雜基質(zhì)里使用要進(jìn)行充分的方法學(xué)驗(yàn)證。氨基酸法是把重組膠原蛋白水解成氨基酸，存在氨基酸水解效率的問題，還有檢測(cè)器靈敏度的問題，同樣需要進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，另外還要考慮如何去除復(fù)雜基質(zhì)的干擾問題。”
她強(qiáng)調(diào)，只有建立了方法學(xué)驗(yàn)證后的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)才能確保檢測(cè)結(jié)果的可信性。
成分檢測(cè)亟需標(biāo)準(zhǔn)
共促行業(yè)有序發(fā)展
值得關(guān)注的是，對(duì)重組膠原蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確檢測(cè)是一個(gè)高度復(fù)雜的過(guò)程，特別是在護(hù)膚品成分這類“復(fù)雜基質(zhì)”中，未經(jīng)完整鏈路的檢測(cè)驗(yàn)證，其數(shù)據(jù)往往缺乏參考價(jià)值。 正因如此，行業(yè)亟需凝聚多方力量，共同推動(dòng)科學(xué)、統(tǒng)一的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的建立與出臺(tái)，有效規(guī)避因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)缺失而導(dǎo)致的功效成分含量不明確等問題，保障消費(fèi)者權(quán)益，并最終助力重組膠原蛋白產(chǎn)業(yè)健康、可持續(xù)發(fā)展。
*數(shù)據(jù)引自新華網(wǎng)報(bào)道研討會(huì)專家共識(shí)
